胰蛋白酶，作為絲氨酸蛋白酶家族的一部分，是一種肽鏈內(nèi)切酶，能夠在賴氨酸和精氨酸的C端精確切割肽鏈。這種生物原材料在生物制品的生產(chǎn)過(guò)程中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，胰蛋白酶可分解細(xì)胞間的粘蛋白和糖蛋白，使得細(xì)胞之間能夠彼此分離，從而順利進(jìn)行傳代培養(yǎng)；在病毒類疫苗的生產(chǎn)過(guò)程中，在病毒培養(yǎng)階段加入適量胰蛋白酶，以促使病毒抗原暴露并與細(xì)胞受體結(jié)合，從而提高了病毒感染效率；在重組蛋白制品的生產(chǎn)中，如重組胰島素的生產(chǎn)，胰蛋白酶也被用作剪切酶，將胰島素原轉(zhuǎn)化為具有生物活性的胰島素，這不僅提高了胰島素的產(chǎn)量，而且保證了胰島素的生物活性。

   當(dāng)前使用較廣泛的胰酶是從動(dòng)物胰臟浸出液中提純凍干后制備而成的，其原料主要來(lái)自豬或牛的胰臟。盡管動(dòng)物源胰酶制備過(guò)程中采用了適當(dāng)?shù)募兓に?，但由于?dòng)物本身可能攜帶多種病毒，如瘋牛病病毒、朊病毒、豬瘟病毒等，加上受到制備工藝、生物原材料的特性和當(dāng)前檢測(cè)手段的限制，動(dòng)物源胰酶存在較高的外源病毒污染風(fēng)險(xiǎn)，可能對(duì)生物制品的安全性造成影響。使用重組生物原料替代動(dòng)物源原料是生物制品生產(chǎn)的主要安全和風(fēng)險(xiǎn)控制手段，中國(guó)藥典2020版也收錄了重組胰蛋白酶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并且隨著DNA重組技術(shù)的不斷發(fā)展，生物技術(shù)藥物優(yōu)勢(shì)越來(lái)越明顯，對(duì)重組胰蛋白酶的需求也將不斷增加，據(jù)廣州恒州誠(chéng)思信息咨詢有限公司發(fā)布的《2022年全球及中國(guó)重組胰蛋白酶行業(yè)頭部企業(yè)市場(chǎng)占有率及排名調(diào)研報(bào)告》顯示，2021年中國(guó)重組胰蛋白酶市場(chǎng)銷售收入達(dá)到了651萬(wàn)美元，預(yù)計(jì)2028年可以達(dá)到1137萬(wàn)美元，2022-2028期間年復(fù)合增長(zhǎng)率(CAGR)為8.22%。

監(jiān)管相關(guān)文件及政策

   國(guó)家藥監(jiān)局于2019年9月發(fā)布了《疫苗上市后生產(chǎn)工藝變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則》（征求意見稿），如果疫苗生產(chǎn)要進(jìn)行符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的原輔料變更，只需備案，即通過(guò)變更流程的簡(jiǎn)化，鼓勵(lì)企業(yè)進(jìn)行無(wú)動(dòng)物源性原輔料的變更。

   中國(guó)藥典2020版三部“生物制品病毒安全性控制”章節(jié)中明確指出：“原材料及輔料應(yīng)符合‘生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制’的相應(yīng)要求，應(yīng)盡可能選擇無(wú)病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)或低風(fēng)險(xiǎn)的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn)，如選擇采用重組技術(shù)生產(chǎn)的生物材料替代動(dòng)物源性生物材料”，并增加了重組胰蛋白酶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（中國(guó)藥典2020年版3603）。相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

圖1 .無(wú)動(dòng)物成分的rTrypsins具有與天然Trypsin相同的細(xì)胞分離效果。

圖2A . Vero細(xì)胞形態(tài)學(xué)顯示Sheffield?rTrypsin比其他市售重組胰蛋白酶分離細(xì)胞快。

圖2B. Sheffield rTrypsin比其他市售重組胰蛋白酶解離細(xì)胞時(shí)間更短。

圖3 . Sheffield?rTrypsin和其他市售重組胰蛋白酶均未發(fā)現(xiàn)明顯毒性。

圖4 . 所有rTrypsins消化傳代后的細(xì)胞倍增水平顯示這些rTrypsins對(duì)細(xì)胞沒(méi)有明顯毒性。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，所有的胰蛋白酶在都能有效地分離單層細(xì)胞，表明rTrypsin可以代替天然胰蛋白酶進(jìn)行細(xì)胞分離(圖1 )。然而，這些被評(píng)估的胰蛋白酶都不能完全分離緊密的細(xì)胞團(tuán)塊。在消化單細(xì)胞層所需的時(shí)間方面，與其它商品化rTrypsin相比，Kerry Sheffield? rTrypsin酶解速度更快(圖2A & B )。細(xì)胞毒性研究表明，所有市售rTrypsins的細(xì)胞活率和細(xì)胞倍增時(shí)間均相近，表明重組胰蛋白酶對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性(圖3、4 )。

Kerry Sheffield?rTrypsin ACF重組胰蛋白酶的優(yōu)點(diǎn)：

• 安全：無(wú)動(dòng)物源成分，避免了外源病毒污染風(fēng)險(xiǎn)，保障了生物安全性。
• 高效：多種細(xì)胞類型適用，且消化效率高、溫和，不傷細(xì)胞，提高細(xì)胞培養(yǎng)效率和成功率。
• 穩(wěn)定：基因序列來(lái)自微生物胰酶，室溫放置一個(gè)月不會(huì)降低活性，穩(wěn)定性強(qiáng)。
• 簡(jiǎn)便：實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，無(wú)需洗細(xì)胞表面和添加胰酶抑制劑，節(jié)省時(shí)間提高效率。

Kerry Sheffield?rTrypsin ACF產(chǎn)品列表

免費(fèi)試用申請(qǐng)

為了滿足廣大客戶的需求，Sheffield? rTrypsin ACF免費(fèi)試用活動(dòng)已開啟，即日起至2023年12月31日，關(guān)注“西美杰微信公眾號(hào)（微信號(hào)xmjsci）”，發(fā)送關(guān)鍵詞“重組胰酶”，填寫試用調(diào)查問(wèn)卷即可獲得免費(fèi)試用機(jī)會(huì)，數(shù)量有限，先到先得。

美國(guó)Kerry集團(tuán)旗下Sheffield Bio-Science服務(wù)于全球超過(guò)70年，作為全球生物制藥疫苗行業(yè)規(guī)模大專業(yè)性強(qiáng)的細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)原料供應(yīng)商，已成為全球單個(gè)藥物年銷售額超過(guò)10億美金的10個(gè)“生物炸彈藥”中7個(gè)生物藥的培養(yǎng)基原料供應(yīng)商，是全球少有的同時(shí)生產(chǎn)酵母粉和蛋白胨并針對(duì)不同細(xì)胞株/菌種開發(fā)提供非動(dòng)物源性復(fù)合添加物系統(tǒng)的生產(chǎn)商，引領(lǐng)全球制藥、疫苗、無(wú)血清培養(yǎng)基、傳統(tǒng)發(fā)酵和診斷培養(yǎng)基工業(yè)的發(fā)展。

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